醫療器械臨床前動(dòng)物實(shí)驗研究是許多Ⅲ類(lèi)醫療器械，特別是創(chuàng )新型醫療器械進(jìn)行臨床試驗研究之前需要開(kāi)展的重要項目。醫療器械安全性和有效性評價(jià)中動(dòng)物試驗是重要手段之一。
引言：醫療器械臨床前動(dòng)物實(shí)驗研究是許多Ⅲ類(lèi)醫療器械，特別是創(chuàng )新型醫療器械進(jìn)行臨床試驗研究之前需要開(kāi)展的重要項目。醫療器械安全性和有效性評價(jià)中動(dòng)物試驗是重要手段之一。
醫療器械臨床試驗前動(dòng)物實(shí)驗研究，作為在臨床試驗之前初步驗證醫療器械安全性及有效性的手段，對于尚沒(méi)有大量臨床應用歷史的高風(fēng)險醫療器械以及創(chuàng )新型醫療器械來(lái)說(shuō)是必要的試驗。我國在2016年3月23日發(fā)布了《醫療器械臨床試驗質(zhì)量管理規范》，在該管理規范中，明確要求在臨床試驗研究之前申請者應當完成必要的動(dòng)物試驗研究以及風(fēng)險分析。關(guān)于是否需要做臨床前動(dòng)物試驗研究應根據產(chǎn)品的風(fēng)險分析進(jìn)行判斷。
2019年4月19日，國家藥品監督管理局（NMPA）發(fā)布了《醫療器械動(dòng)物實(shí)驗研究技術(shù)審查指導原則第一部分：決策原則》，對如何決策是否有必要進(jìn)行臨床前動(dòng)物實(shí)驗研究給出了指導性建議。同日，NMPA發(fā)布了《腹腔內置疝修補補片動(dòng)物實(shí)驗技術(shù)審查指導原則》，給出了針對該類(lèi)產(chǎn)品開(kāi)展動(dòng)物實(shí)驗研究的具體要求。另外，全國外科植入物與矯形器械標準化技術(shù)委員會(huì )組織工程醫療器械產(chǎn)品分技術(shù)委員會(huì )（SAC/ TC110/SC3）組織制定了幾項動(dòng)物實(shí)驗研究相關(guān)的標準，即YY/T 0606.10-2008“組織工程醫療產(chǎn)品第10部分：修復或再生關(guān)節軟骨的植入物體內評價(jià)指南”、YY/T 1575-2017“組織工程醫療器械產(chǎn)品修復和替代骨組織植入物骨形成活性的評價(jià)指南”、YY/T 1598-2018“組織工程醫療器械產(chǎn)品骨用于脊柱融合的外科植入物骨修復或再生評價(jià)試驗指南”、YY/T 1636-2018“組織工程醫療器械產(chǎn)品體內臨界尺寸骨缺損的臨床前評價(jià)指南”。這些標準針對軟骨和骨植入物的臨床前動(dòng)物實(shí)驗研究，給出了實(shí)驗動(dòng)物的選擇、觀(guān)察周期及觀(guān)察終點(diǎn)指標的確定等具體要求和指導。
在臨床前動(dòng)物試驗研究中，試驗結果的真實(shí)、可靠、準確、科學(xué)是實(shí)驗質(zhì)量保障的基礎。而如何進(jìn)行動(dòng)物試驗的質(zhì)量管理是保障動(dòng)物試驗質(zhì)量的根本。目前國際上，例如美國食品藥品監督管理局（FDA）已經(jīng)出臺了相關(guān)的指導原則，即“醫療器械動(dòng)物試驗研究的一般考量”[1]，指導醫療器械在良好實(shí)驗室規范（GLP）框架內進(jìn)行醫療器械的非臨床動(dòng)物試驗研究。我國藥品領(lǐng)域早就發(fā)布了《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規范》[2]，并開(kāi)始對藥品非臨床研究實(shí)施了GLP管理，為從源頭上提高藥物研究水平，保證藥物研究質(zhì)量發(fā)揮了重要作用。然而，醫療器械生物學(xué)試驗還沒(méi)有實(shí)施GLP。GLP管理是保障臨床前動(dòng)物試驗研究質(zhì)量的有力措施，但是，由于醫療器械非臨床研究在實(shí)施GLP管理中，在各個(gè)層面存在著(zhù)許多挑戰，我國在該領(lǐng)域的規范制訂方面尚在不斷完善過(guò)程中。保障醫療器械臨床前動(dòng)物試驗的質(zhì)量，是科學(xué)評價(jià)醫療器械安全有效性的基礎。本文參考美國關(guān)于醫療器械動(dòng)物試驗研究的指南，并參考我國藥品領(lǐng)域《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規范》的要求，就如何在盡可能滿(mǎn)足GLP管理要求之下開(kāi)展醫療器械動(dòng)物試驗研究的考慮要點(diǎn)做一概述，以供相關(guān)研究人員參考。藥品非臨床研究的GLP管理中，對組織機構和人員的配置、職位要求和職能做出了基本的規定[2]，可供醫療器械的非臨床研究參考。然而，由于醫療器械動(dòng)物試驗研究可能涉及的大動(dòng)物種類(lèi)較多，如犬、豬、羊等，因此，動(dòng)物試驗研究小組應包括熟悉這些大動(dòng)物生理學(xué)及病理學(xué)的獸醫參加試驗，其職責是負責動(dòng)物的飼養管理、發(fā)現并解決不良反應，并決定是否作出干預、如何做出相應的干預以及是否出于人道的考慮終止試驗流程。另外，醫療器械的動(dòng)物試驗研究以植入試驗為主，因此，獸醫的職責還包括保存有價(jià)值的組織（特別是局部組織）以及協(xié)助確定器械與不良作用的相關(guān)性。動(dòng)物模型經(jīng)常會(huì )需要特殊的手術(shù)方式，解剖學(xué)限制和創(chuàng )傷閉合的重要特征，研究團隊最需要具有這一部分專(zhuān)業(yè)知識的獸醫。同時(shí)，由于醫療器械植入或介入試驗操作的特殊性，有經(jīng)驗的臨床外科醫生參與植入或介入試驗就顯得十分重要。動(dòng)物試驗研究相關(guān)研究人員應包括不同技術(shù)人員，如臨床醫生、獸醫和獸醫病理學(xué)及影像學(xué)專(zhuān)業(yè)領(lǐng)域的研究者。應保存所有從事動(dòng)物試驗研究或監督動(dòng)物試驗研究人員的培訓經(jīng)歷和從業(yè)經(jīng)驗以及工作描述的檔案。建議應基于此人是否適合本研究評估關(guān)鍵人員能力。建議除了組建一支主力人員隊伍（包括專(zhuān)題負責人、質(zhì)量保證部門(mén)、相關(guān)主要研究者）之外，篩選確定一定數量的專(zhuān)業(yè)人員進(jìn)行監測、處理和取樣，并在此期間主動(dòng)監測以前的動(dòng)物試驗或實(shí)驗室檢測中出現的風(fēng)險。藥品非臨床研究的GLP管理中，規定了動(dòng)物設施、與受試品和對照品相關(guān)的設施以及檔案保管設施的基本要求[2]，可供醫療器械的非臨床研究參考。動(dòng)物實(shí)驗設施設計的主要原則有兩點(diǎn)：一是根據動(dòng)物保護的原則，給予實(shí)驗動(dòng)物以合理的動(dòng)物福利；二是保證動(dòng)物以較自然的生活方式生活，盡可能減少除實(shí)驗本身之外的變量，以保證實(shí)驗結果的可靠性。具體不同設施環(huán)境的要求見(jiàn)如下逐條的詳述。參考藥品非臨床研究的GLP管理中，除了對能夠滿(mǎn)足研究需要的動(dòng)物設施的基本要求[2]之外，動(dòng)物的基本生存條件，包括最小飼養空間、飼養標準、照明與環(huán)境溫濕度控制等參數根據物種及動(dòng)物等級的區別有所不同，可參考GB 14925-2010“實(shí)驗動(dòng)物環(huán)境及設施”。動(dòng)物設施應該足夠大，有滿(mǎn)足實(shí)驗要求的動(dòng)物房間或區域，以確保物種或試驗系統的適當分離。然而，在除術(shù)后監測期需要單獨飼養之外，推薦群居飼養動(dòng)物。建議提供的環(huán)境條件包括玩具、干凈的休息平臺和適當的玩耍與運動(dòng)場(chǎng)地。為保持護理標準，建議動(dòng)物飼養場(chǎng)所（籠具）的地板、墻壁和天花板應無(wú)孔，以便于表面清潔[3-7]。由于許多Ⅲ類(lèi)醫療器械及與外科手術(shù)相關(guān)的植入物需要在亞急性試驗期間頻繁觀(guān)察，建議研究設施中修建有進(jìn)入小型康復室或可提供重癥監護治療（氧氣、用于靜脈給藥的體循環(huán)系統、遠程ECG監測以及溫度和/或濕度調整）的封閉設施通道。另外，建議考慮在封閉的實(shí)驗設施中進(jìn)行一段時(shí)間的動(dòng)物飼養，隨后在穩定期后運輸到更開(kāi)放和能夠沐浴陽(yáng)光的設施[1]。《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規范》第十二條對與受試物和對照品相關(guān)設施的要求[2]可供醫療器械非臨床研究參考。除了《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規范》第十三條對檔案保管設施的基本要求之外，由于醫療器械植入或介入手術(shù)操作的復雜性和風(fēng)險觀(guān)測的需要，重要手術(shù)操作的實(shí)時(shí)錄像監控電子檔案的保管對數據溯源和完整性、真實(shí)性和手術(shù)不良結局與器械本身的關(guān)聯(lián)性評估很重要。計算機化的檔案設施具備阻止未經(jīng)授權訪(fǎng)問(wèn)和病毒防護等安全措施。除了《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規范》第十五至十七條對研究設備的基本要求之外，鑒于醫療器械動(dòng)物實(shí)驗研究通常非常復雜，其所用特殊設備可能會(huì )從委托方向合同研究機構轉移，因此，建議委托方與顧問(wèn)和專(zhuān)題負責人仔細研究實(shí)驗中使用的合同設備保養、維護的相關(guān)知識。參與動(dòng)物實(shí)驗研究計劃的人員應與將實(shí)際實(shí)施研究的人員盡早進(jìn)行頻繁的交流，以確保研究設施擁有用于研究的適當輔助設備和資源。特殊設備的轉移流程及認證、培訓、使用應制定相應的SOP，做好設備使用記錄[1]。除了《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規范》第十八條對受試物和對照品的使用和管理的基本要求[2]之外，鑒于醫療器械的受試物多為固體材料或器械，建議全面表征研究中使用的所有受試物和對照品。由于不斷的工藝改進(jìn)和優(yōu)化，委托方可能在開(kāi)始臨床研究之前研發(fā)多次重復的受試物，因此建議在關(guān)鍵的動(dòng)物實(shí)驗研究使用代表最終臨床設計的受試物。如果沒(méi)有使用最終設計的受試物，應確定最終的臨床設計樣品與動(dòng)物實(shí)驗研究的設計相比，對患者沒(méi)有新的風(fēng)險。建議將受試物和對照品包裝、消毒，并以與臨床產(chǎn)品相同的方式運送到研究現場(chǎng)。應開(kāi)發(fā)一種從采購到使用過(guò)程中全程跟蹤試驗器械和對照器械的方法[1]。實(shí)驗系統，指用于非臨床安全性評價(jià)研究的動(dòng)物、植物、微生物以及器官、組織、細胞、基因等[2]?！端幬锓桥R床研究質(zhì)量管理規范》第二十條[2]對實(shí)驗動(dòng)物的管理同樣適用于醫療器械非臨床研究質(zhì)量管理。建議對以下可能會(huì )影響實(shí)驗系統的因素進(jìn)行評估，以便可以評估其對研究結果的影響，如（1）環(huán)境因素，包括溫度、光照和物理結構；（2）營(yíng)養狀況；（3）穩態(tài)控制，包括電解質(zhì)、血糖、無(wú)菌維持和出血控制、輔助診斷工具，以及用于定義或描述受試品或對照品與動(dòng)物之間的相互作用的材料和方法[1]。4.1 實(shí)驗動(dòng)物的福利和倫理實(shí)驗動(dòng)物的使用應當關(guān)注動(dòng)物福利，遵循“減少、替代和優(yōu)化”的原則，具體可參照GB/T 35892-2018 “實(shí)驗動(dòng)物福利倫理審查指南”的要求進(jìn)行。試驗方案實(shí)施前應當獲得動(dòng)物倫理委員會(huì )批準。應排除環(huán)境條件對研究評估的影響，讓所有動(dòng)物都可以獲得充足的資源，例如食物、水和玩具，以防止欺凌和領(lǐng)地壓力。與操作者的熟悉可以減少動(dòng)物的背景壓力，從而可以最大限度地減少導致實(shí)驗偏離因素，以防對研究結果的解釋造成不利影響。此外，應制定標準操作規程以提供及時(shí)恰當的動(dòng)物醫療護理[1]。動(dòng)物模型選擇的思路應遵循以下原則：一是要最大程度地模擬預期臨床應用的實(shí)驗系統，包括動(dòng)物及其相關(guān)環(huán)境和生理特性。二是動(dòng)物實(shí)驗研究實(shí)施的合理性，風(fēng)險分析要素應涉及為什么選擇該動(dòng)物模型。如果動(dòng)物模型有局限性，器械的一些相關(guān)風(fēng)險最好通過(guò)實(shí)驗室或者尸體實(shí)驗進(jìn)行評價(jià)，并確定其相關(guān)性。除此之外，還應確定實(shí)驗系統的遺傳學(xué)差異（動(dòng)物和人的差異）。如實(shí)驗系統和人的不同、器械的尺寸和輸送系統差異、器械植入的部位和追蹤方式差異，等等。實(shí)驗設施應有一張有關(guān)動(dòng)物標識、實(shí)驗分組、所執行程序的類(lèi)型以及每只動(dòng)物的命運或處置的信息表，以便使任何試驗個(gè)體和對照動(dòng)物都受到監管。4.4 動(dòng)物隔離、檢疫與環(huán)境適應實(shí)驗動(dòng)物到達實(shí)驗設施后，應記錄實(shí)驗動(dòng)物來(lái)源、到達日期、數量并進(jìn)行隔離檢疫。動(dòng)物檢疫可按照GB 14922.1-2001“實(shí)驗動(dòng)物寄生蟲(chóng)學(xué)等級及監測”及GB 14922.2-2011 “實(shí)驗動(dòng)物微生物學(xué)等級及監測”進(jìn)行。建議建立標準操作規程，給予動(dòng)物足夠的隔離和適應期以及社會(huì )化/群體化程序[8]。應盡可能控制疾病和心理壓力的背景水平。農場(chǎng)飼養的動(dòng)物特別容易產(chǎn)生腸道寄生蟲(chóng)，這些寄生蟲(chóng)通常在亞臨床水平存在，但是在手術(shù)期和壓力恢復期可能會(huì )引起臨床綜合征狀。為了盡量減少這種偏離因素，建議與主治獸醫進(jìn)行頻繁的溝通，探討檢測和消除臨床和亞臨床疾病的方法，以確保動(dòng)物健康。為了盡量減少動(dòng)物在運輸過(guò)程中的壓力，建議考慮使用帶有高架地板、軟緩沖休息裝置、碳纖維、干草網(wǎng)或其他舒適設施以及食物/水裝置的運輸籠。運輸車(chē)輛應當為動(dòng)物提供暖氣和空調以盡可能減小運輸壓力[8-9]。醫療器械的安全性評估通?；谒峁┯行Э茖W(xué)證據的動(dòng)物實(shí)驗研究，應具有適當的標準操作規程，以確保數據的質(zhì)量和完整性。研究機構應當制定與其業(yè)務(wù)相適應的標準操作規程。關(guān)于需要制定的標準操作規程可參考《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規范》第七章的合計15項條款。建議動(dòng)物實(shí)驗研究包括適當的控制措施以盡量減少實(shí)驗的變異性和差錯。這樣的措施包括但不限于在試驗過(guò)程中盡量減少影響實(shí)驗動(dòng)物的因素。6.1 實(shí)驗計劃和實(shí)驗方案制定首先，動(dòng)物實(shí)驗研究必須經(jīng)過(guò)周密計劃。為此，實(shí)驗計劃需要有一定資質(zhì)的機構或者個(gè)人提出，由有適當資質(zhì)和經(jīng)驗的指定的專(zhuān)題負責人進(jìn)行指導。專(zhuān)題負責人宜在實(shí)驗場(chǎng)所辦公，便于指導和監督實(shí)驗技術(shù)的實(shí)施。專(zhuān)題負責人負責研究結果的解釋、分析、形成文件和報告。實(shí)驗方案應包括《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規范》第八章第二十九條中所要求的適用于一般GLP方案的十五項要素，并宜包含如特殊環(huán)境下的研究規范（操作指南）。任何最終已通過(guò)的實(shí)驗方案的改變和修改以及修改原因都必須經(jīng)由專(zhuān)題負責人簽字并簽署日期。實(shí)驗方案和任何修改必須提供給質(zhì)量保證部門(mén)檢查。研究開(kāi)始前需要先通過(guò)動(dòng)物倫理委員會(huì )對已確定的實(shí)驗方案進(jìn)行審批。為了確定實(shí)驗動(dòng)物的數量和實(shí)驗分組，宜先進(jìn)行實(shí)驗室預試研究，同時(shí)從中可以確定適當的實(shí)驗對照、預期實(shí)驗干擾因素和最適當的觀(guān)察間隔等條件。由于研究的最初目的是評價(jià)醫療器械的安全性和性能，因此，醫療器械動(dòng)物實(shí)驗研究的設計應帶有風(fēng)險研究的目的，這些風(fēng)險可以通過(guò)已知的一些因素進(jìn)行預測，這些因素包括器械本身的設計、任何器械型號的已知風(fēng)險和在此前的研究例如動(dòng)物可行性試驗/臺架試驗、實(shí)驗室實(shí)驗/測試中可能出現的新風(fēng)險等，并通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗進(jìn)一步驗證和評價(jià)。建議充分考慮器械的風(fēng)險分析，設計研究項目應能夠評價(jià)器械的所有風(fēng)險，考慮已知的器械型號相關(guān)的任何風(fēng)險。以下是評估特定風(fēng)險類(lèi)型的建議：動(dòng)物實(shí)驗方案盡可能模擬臨床設計和使用。應當確認在輸送、植入或使用器械中的所有步驟，并制定每一個(gè)步驟的可接受標準。建議對每個(gè)驗收標準應用半客觀(guān)的評定量化表（例如李克特量表，Likert scale）。如果器械與輔助設備一同輸送或使用，則可接受標準應包含評估系統相容性的要素。評級標準應當囊括從器械準備到放置或使用乃至取回和重新放置過(guò)程中的所有步驟。如果器械通過(guò)手術(shù)放置，則應描述器械從進(jìn)入體壁到最終器械操作期間的所有步驟。評價(jià)醫療器械的安全性風(fēng)險，包括（1）生理反應：醫療器械進(jìn)入機體可能會(huì )導致機械或生物負荷甚至創(chuàng )傷。建議在局部區域、植入位點(diǎn)相鄰部位，乃至往返于植入位點(diǎn)的所有路徑中確定關(guān)鍵的生物反應變量。強烈建議與病理學(xué)專(zhuān)家合作制訂實(shí)驗方案。（2）無(wú)法預測的發(fā)病與死亡：應全面解釋所有觀(guān)察到的動(dòng)物疾病和死亡案例。應獲得關(guān)于這些事件是否與器械有關(guān)的完整的支持依據。獸醫臨床結果的陳述必須有適當的證據、記錄和報告的支持。如果死亡或疾病可能間接歸因于該器械，則應討論這種情況的病因。評估包括術(shù)后、中期和終期臨床病理學(xué)，包括血化學(xué)、血液學(xué)和附有實(shí)驗室參考范圍值的凝血概況、影像報告和用于特定評估的病例報告（例如電生理學(xué)、行為學(xué)和神經(jīng)學(xué)評估）等等。（3）下游的和全身反應：建議評估該器械是否對遠離放置/植入或使用的部位有影響。如果認為所評價(jià)器械有這類(lèi)潛在風(fēng)險，那么研究目的應包含評估其他組織（如血液接觸器械的下游組織，或其它相關(guān)的終端器官組織）。這些可能會(huì )成為證明器械及其輸送系統潛在全身影響的一部分證據。如果這些問(wèn)題可能存在，應制定計劃來(lái)評估受影響的組織數量、程度以及是否會(huì )導致功能性障礙。某些受試品常常與某些特定的附屬裝置或部件結合使用。當試驗器械必須與附件一同使用時(shí)，這些附件有時(shí)被描述為實(shí)驗系統的一部分。在這種情況下，應考慮動(dòng)物實(shí)驗研究中使用的任何附屬器械是否與試驗器械完全分離，或者附屬器械是否將與受試品一起上市銷(xiāo)售；以及器械的最終標簽是否包含附屬器械選擇或使用的說(shuō)明。建議在實(shí)驗動(dòng)物中評價(jià)/測試醫療器械的方法和材料應與使用在現代獸醫和醫院中的方法類(lèi)似。監測和干預策略應基于獸醫和專(zhuān)業(yè)人員以往的經(jīng)驗。一旦確定動(dòng)物實(shí)驗研究中可以解決的失敗模式和影響因素，則應制定動(dòng)物實(shí)驗方案以解決每項已識別的風(fēng)險，并規定監測、干預措施和結果評估的頻次和類(lèi)型。實(shí)驗方案應經(jīng)過(guò)項目委托方認可同意，并由專(zhuān)題負責人簽名并簽署日期。實(shí)驗方案一旦確定，參加研究的工作人員應當嚴格執行實(shí)驗方案和相應的標準操作規程，參照《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規范》第三十條的要求實(shí)施[2]。建議根據已知風(fēng)險和器械使用的預計結果來(lái)制訂針對研究項目的關(guān)鍵干涉和時(shí)間點(diǎn)的日程。這些時(shí)間點(diǎn)通常包括（1）對器械性能和/或動(dòng)物反應進(jìn)行全面表征、植入和中間檢查檢測；（2）器械的取出（如果是植入物）；（3）全面分析任何取出的組織；（4）組織制備；（5）起草和簽署最終書(shū)面報告。建議質(zhì)量保證部門(mén)或者團隊了解這些關(guān)鍵項目日程，以便安排中期實(shí)驗監測和檢查。由于醫療器械可能的侵襲性和動(dòng)物存活時(shí)間上的差異，研究期間可能需要根據臨時(shí)數據調整這些參數。例如，如果早于預期時(shí)間點(diǎn)檢測到不良結果，則應考慮改進(jìn)觀(guān)察和器械取出的時(shí)間表，以避免丟失有用的數據。6.3 動(dòng)物實(shí)驗實(shí)施建議在動(dòng)物實(shí)驗設計中設置一個(gè)對照組，或解釋為什么不設置對照組。此外，應使用足夠數量的動(dòng)物來(lái)支持醫療器械安全性和性能的驗證結果。動(dòng)物數量的確定最好在臺架測試和器械的迭代研究完成之后。研究中動(dòng)物的數量應基于合理的科學(xué)依據，并考慮到模型的難度，以及是否可在一只動(dòng)物中合理研究一種或多種受試物和對照品。根據經(jīng)驗，較高級物種（例如，綿羊、山羊、非人靈長(cháng)類(lèi)動(dòng)物）的典型動(dòng)物實(shí)驗研究通常每組/時(shí)間點(diǎn)有3~9只動(dòng)物。但是，在任何情況下，方案中都應提供所用動(dòng)物數量的科學(xué)依據。建議動(dòng)物實(shí)驗研究的實(shí)施人員預先確定飼料類(lèi)型和數量，指定籠子的尺寸，且在圈養狀態(tài)下飼料容器的位置和數量應該充足。還應考慮遵循飼養限制特殊規定的其他研究標準。動(dòng)物體重的下降有時(shí)很難解釋?zhuān)@使得很難確定體重的下降是否與器械相關(guān)。因此，應確保對動(dòng)物個(gè)體特別是圈養動(dòng)物進(jìn)行連續監測，記錄食欲、進(jìn)食量和飲水量、排尿和排便的具體情況。欺凌和資源獨占造成的熱量攝入量或液體攝入量降低通常會(huì )導致體重減輕。在慢性（長(cháng)周期）研究中，入組的動(dòng)物（如反芻動(dòng)物）通常被轉移到更典型的農業(yè)飼養環(huán)境中，允許動(dòng)物在開(kāi)放牧場(chǎng)放牧和/或喂食干草作為其飲食的組成部分。動(dòng)物實(shí)驗研究機構應確保牧場(chǎng)沒(méi)有潛在的有毒植物、寄生蟲(chóng)卵和其他潛在污染物，并且牧場(chǎng)的條件（土壤、草地）符合動(dòng)物的營(yíng)養需求，包括礦物質(zhì)。一些物種可能對土壤中有機礦物質(zhì)不平衡很敏感（例如，羊對銅和鉬不平衡敏感），這可能會(huì )不經(jīng)意地導致中毒（銅對羊的毒性）。生長(cháng)促進(jìn)劑，如莫能菌素是另一種常見(jiàn)的無(wú)意的毒性來(lái)源，這是由于定量配制中的錯誤或給一個(gè)物種喂養另一個(gè)物種的配比造成的。必須定期檢查飼料和水，以確保已知可能干擾研究的污染物不會(huì )超出方案規定的水平。動(dòng)物實(shí)驗研究機構應認識到這些潛在問(wèn)題，并在編寫(xiě)標準操作規程時(shí)處理這些問(wèn)題，這些程序涉及定期測試水和飼料中潛在的污染物、牧場(chǎng)土壤和植物的營(yíng)養平衡、培訓員工閱讀配給標簽及喂特定物種相應的配比等。建議遵循獸醫護理標準[9, 11-17]。例如，實(shí)驗動(dòng)物監控頻率和強度應保證能對由器械造成的已知風(fēng)險進(jìn)行充分分析，這些監控參數應當與研究機構的獸醫一起確定。這種監測不僅出于人道的原因，它也可以幫助我們根據可能歸因于該器械的因素分類(lèi)常見(jiàn)的自發(fā)癥狀。要評估的重要特性指標包括但不限于（1）呼吸頻率、模式和深度；（2）血壓；（3）心率和脈搏特征；（4）靜息和運動(dòng)時(shí)黏膜顏色；（5）姿態(tài)；（6）精神狀態(tài)；（7）步態(tài)；（8）是否存在腹部、膀胱或腸膨脹。下面提供了關(guān)于動(dòng)物實(shí)驗研究監測的具體建議：（1）術(shù)中監測：術(shù)中和術(shù)后對心率、心電圖、血壓和血氣的監測有助于獲得積極結果。（2）急性（短期）研究：建議跟蹤記錄生命體征，如手術(shù)時(shí)記錄的心律、呼吸頻率、脈搏和血壓。這些信息應與植入、放置或使用裝置、造影劑或其他裝置相關(guān)材料的時(shí)間相關(guān)聯(lián)，并在麻醉和手術(shù)記錄中注明。（3）慢性（長(cháng)期）研究：慢性研究包括如下不同時(shí)期：①術(shù)后護理：建議遵循目前的實(shí)驗室實(shí)驗動(dòng)物護理標準，保持動(dòng)物體溫正常，盡量減少疼痛和感染，并提供充足的液體和電解質(zhì)[10, 16-20]。獲取動(dòng)物生理信息的質(zhì)量應與人類(lèi)護理和康復中所獲得的信息相類(lèi)似。此外，還應建立一個(gè)標準評估模式來(lái)控制壓力變量，以監測疼痛和體溫，并根據中期結果指導額外的保溫和止痛藥使用。②中期觀(guān)察：在動(dòng)物從初始手術(shù)過(guò)程中恢復，監測器械相關(guān)風(fēng)險期間，建議每天至少在喂食時(shí)間監測兩次，以便在活動(dòng)時(shí)觀(guān)察它們。同時(shí)，建議咨詢(xún)獸醫并制定體重監測計劃。應考慮將體重評分作為定期觀(guān)察動(dòng)物的輔助手段[13, 21-24]。如果研究涉及收集臨床生化檢測數據或更先進(jìn)的診斷，建議制定標準操作規程以便在需要時(shí)指定一種不干擾器械的化學(xué)干預方法。③終期研究期：建議實(shí)驗方案應包括終期研究的細節，并包括檢查、采集和組織處理的所有方法。具體方案應包括終點(diǎn)檢驗的方法、完成活體放射線(xiàn)分析和成像分析的陳述(如果適用）、確定最終體重和機體評分的方法。④尸體解剖和評估：不良事件可能會(huì )出現在臨床或亞臨床期。因此，建議在研究中納入全面的系統性尸檢，包括組織收集和保存，以進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。所得信息可協(xié)助確定不良事件與器械的相關(guān)性。（1）植入物影像（如放射影像、microCT）：在準備器械的組織病理分析之前，宜考慮是否進(jìn)行植入物結構完整性分析，這將有助于確定器械安全性。（2）掃描電子顯微鏡（SEM）：建議使用掃描電子顯微鏡對取出的植入器械表面進(jìn)行充分分析。（3）組織形態(tài)計量分析：由于對急性和慢性生物反應的正確詮釋對安全性評估至關(guān)重要，尤其是在缺乏臨床數據的情況下。建議在確定組織形態(tài)計量分析的組織樣本準備方法時(shí)聽(tīng)取獸醫或臨床病理學(xué)專(zhuān)家的意見(jiàn)。除此之外，建議預先建立客觀(guān)方法來(lái)評估和分析所有組織損傷和炎癥。評估應考慮的評價(jià)指標，如炎癥、血管生成、鈣化、蛋白多糖/膠原蛋白和纖維蛋白/血栓等。（4）局部和下游組織評價(jià)：大多數器械（包括植入物和輸送系統組件）都具有從器械的結構元素或涂層中形成栓塞微?；蛭⒀ǖ臐撛谀芰?，影響觀(guān)察結果，例如與血液接觸的器械導致的壓力性壞死和周?chē)M織或上/下游組織炎癥的觀(guān)察。如果存在上游栓塞的風(fēng)險，應打開(kāi)顱蓋并做大腦切片。如果風(fēng)險分析中確定了器械的潛在風(fēng)險，建議病理學(xué)研究應包括上/下游和周?chē)M織的系統性評價(jià)。關(guān)于動(dòng)物實(shí)驗研究總結報告應當包括的主要內容可參照《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規范》的第三十三條規定的內容。可參照《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規范》的第九章和第十章規定的內容進(jìn)行質(zhì)量保證和資料檔案。