人類(lèi)免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑臨床前注冊審查指導原則

本指導原則旨在指導醫療器械注冊申請人對人類(lèi)免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑性能評價(jià)研究注冊申報資料的準備及撰寫(xiě)，同時(shí)也為技術(shù)審評部門(mén)對注冊申報資料的技術(shù)審評提供參考。

本指導原則是對人類(lèi)免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑的一般要求，申請人應依據產(chǎn)品的具體特性確定其中內容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應的科學(xué)依據，并依據產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內容進(jìn)行充實(shí)和細化。

本指導原則是對醫療器械注冊申請人和審查人員的指導性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項，亦不作為法規強制執行，如果有能夠滿(mǎn)足相關(guān)法規要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細的研究資料和驗證資料，相關(guān)人員應在遵循相關(guān)法規的前提下使用本指導原則。

本指導原則是在現行法規和標準體系以及當前認知水平下制定的，隨著(zhù)法規和標準的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導原則相關(guān)內容也將適時(shí)進(jìn)行調整。

一、適用范圍

艾滋病，即獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)，其病原體為人類(lèi)免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV），亦稱(chēng)艾滋病病毒，屬于反轉錄病毒科慢病毒屬。

從全球流行情況來(lái)看，HIV-1流行率最高，尤其是HIV-1的M組是全球艾滋病的主要致病原。 HIV-2型的感染人群主要分布在非洲西部國家，其他國家地區也偶有報道。

HIV的實(shí)驗室檢測主要包括HIV抗原抗體檢測、HIV核酸檢測、CD4+T淋巴細胞計數、HIV耐藥檢測等。其中HIV抗體檢測包括篩查試驗和補充試驗。

本指導原則適用于采用免疫層析法、化學(xué)發(fā)光法、時(shí)間分辨免疫熒光法等免疫學(xué)方法，體外定性檢測人血清、血漿、全血、口腔黏膜滲出液、尿液等的人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體檢測試劑及抗原抗體聯(lián)合檢測試劑的性能評價(jià)部分。結合臨床和其他實(shí)驗室指標，可用于人類(lèi)免疫缺陷病毒感染的輔助診斷。對基于其他方法學(xué)或檢測靶標的試劑、自測類(lèi)檢測試劑，可能部分要求不完全適用或本文所述內容不夠全面，申請人可以參照本指導原則，根據產(chǎn)品特性對適用部分進(jìn)行評價(jià)或補充其他的評價(jià)資料進(jìn)行相應驗證。對于該類(lèi)產(chǎn)品的臨床研究資料參照《人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測試劑臨床研究注冊技術(shù)審查指導原則》。

本指導原則不適用于國家法定血源篩查用HIV檢測試劑。

二、注冊審查要點(diǎn)

（一）監管信息

1. 產(chǎn)品名稱(chēng)及分類(lèi)編碼

產(chǎn)品名稱(chēng)應符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場(chǎng)監督管理總局令第48號）及相關(guān)法規的要求，如人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體檢測試劑（化學(xué)發(fā)光法）。根據《體外診斷試劑分類(lèi)規則》，該產(chǎn)品按照第三類(lèi)體外診斷試劑管理，分類(lèi)編碼為6840。

2. 其他信息還包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報前與監管機構的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品描述、預期用途、申報產(chǎn)品上市歷史等內容。產(chǎn)品描述中應說(shuō)明產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理。同類(lèi)產(chǎn)品上市情況介紹部分應著(zhù)重從方法學(xué)、檢測原理、特異性抗原抗體等主要組成成分、樣本類(lèi)型等方面寫(xiě)明擬申報產(chǎn)品與目前市場(chǎng)上已獲批準的同類(lèi)產(chǎn)品之間的主要區別。

（三）非臨床資料

1. 產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗報告

申請人應當在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩定的前提下，根據產(chǎn)品研制、前期評價(jià)等結果，依據國家標準、行業(yè)標準及有關(guān)文獻資料，按照《醫療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫(xiě)指導原則》（2022年第8號）的要求編寫(xiě)。該類(lèi)產(chǎn)品作為第三類(lèi)體外診斷試劑，應當以附錄形式明確主要原材料及生產(chǎn)工藝要求。

如有適用的國家標準、行業(yè)標準，產(chǎn)品技術(shù)要求的相關(guān)要求應不低于相應的要求。如該項目已有國家標準品，技術(shù)要求中應體現國家標準品的相關(guān)要求，并使用國家標準品對三批產(chǎn)品進(jìn)行檢驗。

人類(lèi)免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑的產(chǎn)品性能指標應主要包括：物理性狀、陽(yáng)性參考品符合率、陰性參考品符合率、重復性、最低檢測限等。

2. 分析性能研究

申請人應提交在符合質(zhì)量管理體系的生產(chǎn)環(huán)境下生產(chǎn)的試劑進(jìn)行的所有性能評估資料，包括具體研究方法、實(shí)驗方案、實(shí)驗數據、統計分析等詳細資料。有關(guān)分析性能評估的背景信息也應在申報資料中進(jìn)行描述，包括實(shí)驗地點(diǎn)，采用的試劑名稱(chēng)、規格和批號，儀器名稱(chēng)和型號，樣本類(lèi)型和來(lái)源等。分析性能評估的實(shí)驗方法可以參考國際或國內有關(guān)體外診斷試劑性能評估的指導原則進(jìn)行，建議著(zhù)重對以下分析性能進(jìn)行研究。人類(lèi)免疫缺陷病毒抗原和抗體的性能應分別研究。不同性能評估試驗建議采用不同的臨床樣本。

2.1樣本穩定性

一般包括樣本各種實(shí)際運輸及儲存（常溫、冷藏和冷凍）條件下的保存期限驗證，以確認樣本的保存條件及保存時(shí)間?？梢栽诤侠淼臏囟确秶鷥?，每間隔一定的時(shí)間段即對儲存樣本進(jìn)行驗證，從而確認不同類(lèi)型樣本的穩定性?？衫鋬霰４娴臉颖具€應對凍融次數進(jìn)行合理驗證。

2.2適用的樣本類(lèi)型

如果試劑適用于多種樣本類(lèi)型，應分別進(jìn)行性能評估評價(jià)每種樣本類(lèi)型的適用性。如產(chǎn)品適用于血清和血漿，可采用同源比對驗證樣本的可比性和各種抗凝劑的適用性。如產(chǎn)品適用于靜脈全血，建議進(jìn)行最低檢測限和精密度研究，同時(shí)進(jìn)行同源比對試驗。

應以列表形式說(shuō)明各項分析性能評估中使用的樣本類(lèi)型及其來(lái)源。

2.3企業(yè)參考品檢驗

根據主要原材料研究資料中的企業(yè)參考品設置情況，采用三批產(chǎn)品對企業(yè)參考品進(jìn)行檢驗并提供詳細的實(shí)驗數據。

2.4準確度

抗體檢測試劑：采用同類(lèi)已上市產(chǎn)品，檢測同一套樣本的方式，比較檢測結果的差異。樣本應選擇一定數量符合樣本穩定性的預期人群樣本，且包含干擾及交叉樣本，納入孕婦、自身免疫系統疾病、慢性代謝病等人群。樣本應注意對常見(jiàn)型別/流行株的覆蓋，建議包含不同來(lái)源、不同感染期（急性期、無(wú)癥狀感染期、艾滋病期）的臨床樣本。應采用合理方法確認抗體類(lèi)型和濃度，提供詳細的確認方法及結果。

對于難以獲得臨床樣本的1型M組其他亞型、1型O組、2型可通過(guò)檢測3套及以上商業(yè)參考盤(pán)分析申報產(chǎn)品檢測結果與經(jīng)確認結果的符合情況，評價(jià)申報產(chǎn)品的檢測準確度。此處所述參考盤(pán)指已經(jīng)診斷準確度標準/其他成熟方法檢測確認過(guò)的，或有準確臨床診斷信息的，由多份樣本組成的一套樣本。

抗原檢測試劑：可通過(guò)臨床樣本、商業(yè)參考盤(pán)、病毒培養物或重組抗原樣本對上述型別進(jìn)行驗證。

2.5精密度

HIV-1 M組抗體、HIV-1 O組抗體、HIV-2抗體、抗原應分別進(jìn)行精密度研究。應選擇臨床樣本、病毒培養物或重組抗原，HIV-1 O組抗體、HIV-2抗體可選擇商業(yè)參考盤(pán)進(jìn)行研究。

2.5.1 重復性、中間精密度和再現性

申請人應對精密度指標的評價(jià)標準做出合理要求，如變異系數的范圍或顯色強度等。應對可能影響檢測精密度的主要變量進(jìn)行驗證，包括不同時(shí)間、地點(diǎn)、操作者、檢測輪次、試劑批次、適用儀器（如適用）等。

設定合理的精密度評價(jià)周期，例如：為期至少20天的檢測。至少采用3個(gè)水平的臨床樣本進(jìn)行精密度評價(jià)，具體要求如下：

陰性樣本：待測物濃度低于最低檢測限或為零濃度，陰性檢出率應為100%（n≥20）。

臨界陽(yáng)性樣本：待測物濃度略高于試劑的最低檢測限，陽(yáng)性檢出率應大于95%（n≥20）。

中/強陽(yáng)性樣本：待測物濃度呈中度到強陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率為100%，變異系數（CV）應在合理的可接受范圍內（如適用）（n≥20）。

2.5.2 臨界值水平的精密度研究（如適用）

除上述精密度研究外，建議申請人對申報產(chǎn)品的臨界值進(jìn)行確定，并采用該濃度/水平樣本進(jìn)行精密度研究。

首先建立C50濃度，并通過(guò)對該濃度水平樣本進(jìn)行多次重復檢測，以對C50濃度進(jìn)行確認。而后以各濃度水平樣本進(jìn)行多次重復檢測的方式，判斷某一特定可接受范圍。

申請人可結合產(chǎn)品的特點(diǎn)，設置合理的（單側或雙側）置信度水平，采用合理的統計方法對數據進(jìn)行分析。推薦對C50±20%兩個(gè)濃度水平分別重復進(jìn)行40次檢測，當+20%濃度水平全部為陽(yáng)性，-20%濃度水平全部為陰性時(shí)，得出-20%到+ 20%濃度范圍包含C5～C95區間的置信度＞80%。

2.6包容性

抗體檢測試劑：應選擇來(lái)源于不同時(shí)間、不同地域的多份臨床確診且經(jīng)合理方法確定人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體陽(yáng)性的患者樣本或商業(yè)參考盤(pán)進(jìn)行檢測，建議覆蓋1型M組（包括B/B'型、 CRF 07_BC重組型、CRF 08_BC重組型、CRF 01_AE重組型、CRF 55_01B在內的至少10種亞型或重組型）、1型O組、2型。

抗原檢測試劑：應選擇來(lái)源于不同時(shí)間、不同地域的多份臨床確診且經(jīng)合理方法確定人類(lèi)免疫缺陷病毒抗原陽(yáng)性的患者樣本/病毒培養物或商業(yè)參考盤(pán)進(jìn)行包容性評價(jià)。包容性評價(jià)檢測結果應與預期結果相符。驗證用樣本的濃度水平應接近檢測限濃度，可采用臨床陰性樣本進(jìn)行稀釋。

2.7最低檢測限

抗體檢測試劑：至少包括1型M組（B/B'型、BC重組型（包括CRF 07_BC重組型和CRF 08_BC重組型）、AE重組型（CRF 01_AE重組型））、1型O組、2型。建議采用已明確人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體滴度的臨床陽(yáng)性樣本，其中1型O組、2型可選用商業(yè)參考盤(pán)。一般情況下應采用陰性樣本系列稀釋?zhuān)瑢τ诳谇火つB出液和尿液，可采用模擬基質(zhì)系列稀釋?zhuān)♂尯筮M(jìn)行最低檢測限的建立和驗證。應采用合理方法確認抗體類(lèi)型和滴度，提供詳細的確認方法及結果。

抗原檢測試劑：建議采用已明確人類(lèi)免疫缺陷病毒抗原濃度的臨床陽(yáng)性樣本/病毒培養液/標準品/商業(yè)參考盤(pán)或重組抗原，驗證型別與抗體檢測試劑相同。采用陰性樣本或基質(zhì)進(jìn)行系列稀釋?zhuān)M(jìn)行最低檢測限的建立和驗證。應采用合理方法確認抗原類(lèi)型和濃度，提供詳細的確認方法及結果。最低檢出限建議不低于相關(guān)標準要求。

2.7.1最低檢測限確定

每個(gè)型別選取至少3份樣本，系列稀釋獲得多個(gè)濃度梯度，每個(gè)濃度重復檢測不少于3次，以100%可檢出的最低濃度水平作為預設檢測限。在此濃度附近制備若干濃度梯度樣品，每個(gè)濃度至少重復檢測20次，將具有95%陽(yáng)性檢出率的最低濃度作為最低檢測限。

2.7.2最低檢測限驗證

選擇與2.7.1不同的3份樣本，采用陰性基質(zhì)稀釋到最低檢測限濃度水平進(jìn)行驗證，應達到95%陽(yáng)性檢出率。

2.8分析特異性

2.8.1交叉反應

用于人類(lèi)免疫缺陷病毒交叉反應驗證的病原體種類(lèi)主要考慮以下幾方面：抗原結構具有同源性、易引起相同或相似的臨床癥狀、采樣部位正常寄生或易并發(fā)的其他微生物。

如果試劑原料采用基因重組抗原，則還需考慮對重組基因導入微生物特異性抗體的交叉反應評價(jià)。例如采用大腸埃希菌作為宿主菌進(jìn)行重組抗原的表達，建議考慮大腸埃希菌抗體陽(yáng)性樣本可能產(chǎn)生的交叉反應。

交叉反應物的抗原抗體應分別進(jìn)行驗證，建議在病原體的醫學(xué)相關(guān)水平進(jìn)行交叉反應的驗證。通常病毒最低濃度為105 PFU/mL，細菌或者真菌的最低濃度為106 CFU/mL，提供所有用于交叉反應驗證的病毒/樣本的來(lái)源、種屬/型別、陰陽(yáng)性鑒定和濃度/滴度確認等試驗資料。

抗體試劑建議進(jìn)行的交叉反應病原體：Ⅰ/Ⅱ型人類(lèi)嗜T細胞病毒、梅毒螺旋體、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、巨細胞病毒、EB病毒、結核分枝桿菌、Ⅰ/Ⅱ型單純皰疹病毒、水痘帶狀皰疹病毒、馬爾內菲青霉菌、人乳頭瘤病毒、人細小病毒B19。

抗原試劑建議進(jìn)行的交叉反應病原體：甲型流感病毒、乙型肝炎病毒、巨細胞病毒、EB病毒、結核分枝桿菌、Ⅰ/Ⅱ型單純皰疹病毒、水痘帶狀皰疹病毒、念珠菌、人乳頭瘤病毒、人細小病毒B19、風(fēng)疹病毒、馬爾內菲青霉菌、支原體、隱球菌。

2.8.2干擾試驗

應根據所采集樣本類(lèi)型，選擇適用的干擾物質(zhì)進(jìn)行研究。建議申請人在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度（“最差條件”）下，采用待測抗體/抗原為弱陽(yáng)性和陰性水平的多例樣本進(jìn)行試驗，應至少包括下列可能的干擾物質(zhì)。

內源性干擾物質(zhì)：

血液：血紅蛋白、膽紅素、血脂、類(lèi)風(fēng)濕因子、其他自身免疫性抗體（如抗核抗體、系統性紅斑狼瘡），異嗜性抗體（如HAMA）、總IgG、總IgM、紅細胞壓積（全血樣本適用）。

口腔黏膜滲出液：唾液（蛋白）、漱口水、薄荷糖、食物殘渣、牙膏。

尿液：尿潛血、總蛋白、尿膽紅素、尿液白細胞、紅細胞、尿酮體、尿膽原、亞硝酸鹽、葡萄糖、細菌、真菌、尿比重和pH異常樣本

外源性干擾物質(zhì)：

常見(jiàn)治療性藥物：主要包括抗反轉錄病毒藥物（核苷類(lèi)反轉錄酶抑制劑、非核苷類(lèi)反轉錄酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、整合酶抑制劑、融合抑制劑）、抗病毒藥物（鳥(niǎo)苷類(lèi)、阿昔洛韋、伐昔洛韋、奧司他韋等）、抗生素、抗炎鎮痛藥（阿司匹林、洛索洛芬、布洛芬等）、抗結核藥（利福平、異煙肼等）及其他針對機會(huì )性感染疾病的治療藥物、癥狀相關(guān)其他經(jīng)驗性藥物（如激素類(lèi)藥物）。

其他外源性干擾物：乙醇、咖啡因、常見(jiàn)及新型毒品（選擇性驗證）。

2.9高劑量鉤狀效應

HIV-1抗體、HIV-2抗體、抗原應分別進(jìn)行鉤狀效應研究，須采用多份高滴度臨床樣本或重組抗原進(jìn)行梯度稀釋后由低濃度至高濃度分別檢測，每個(gè)梯度的稀釋液重復3～5次，對鉤狀效應進(jìn)行合理的驗證。

2.10其他需注意問(wèn)題

對于使用儀器進(jìn)行結果判讀的產(chǎn)品，應提供產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)【適用機型】項中所有型號儀器的性能評估資料。

2.11反應體系

反應體系研究資料包括樣本的制備方式（采集和處理）、樣本要求、樣本用量、試劑用量、反應條件、質(zhì)控方法、結果判讀方式等。

反應條件確定：申請人應考慮反應時(shí)間、判讀時(shí)間、反應溫度、洗滌液體積和洗滌次數（如涉及）等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過(guò)實(shí)驗確定上述條件的最佳組合。

反應體系中樣品加樣方式及加樣量確定：通過(guò)實(shí)驗確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測，申請人還應對樣本稀釋液及其用量、其他必要的處理方法、采樣時(shí)間點(diǎn)（用藥前后、刷牙前后、餐前餐后、尿液采集時(shí)間/尿段）、專(zhuān)用采樣工具等進(jìn)行研究。

3. 穩定性研究

主要包括實(shí)時(shí)穩定性（有效期）、開(kāi)瓶（開(kāi)封）穩定性、凍融穩定性（如涉及）、機載穩定性（如涉及）、運輸穩定性等研究。如果產(chǎn)品配套校準品，還應對校準頻率進(jìn)行研究。申請人可根據實(shí)際需要選擇合理的穩定性研究方案。穩定性研究資料應包括研究方法的確定依據、具體的實(shí)施方案、接受標準、詳細的研究數據以及結論。對于實(shí)時(shí)穩定性研究，應提供至少三批樣品在實(shí)際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

4. 陽(yáng)性判斷值研究

提交對申報試劑陰性/陽(yáng)性結果判斷的陽(yáng)性判斷值（cut-off）研究資料，包括具體的試驗方案、人群及樣本選擇、評價(jià)標準、統計學(xué)分析和研究數據等。建立陽(yáng)性判斷值的樣本選擇應考慮不同的地理區域、不同的感染階段和生理狀態(tài)等因素的影響，納入陰性、陽(yáng)性及臨界值附近的樣本。申請人應根據具體情況選擇適當的方法，如受試者工作特征曲線(xiàn)（ROC）的分析方式，來(lái)確定合理的陽(yáng)性判斷值。若試驗結果存在灰區，則應明確灰區建立的基礎。

如產(chǎn)品適用多個(gè)樣本類(lèi)型，應明確不同的樣本類(lèi)型是否存在差異，如無(wú)差異，可采用一個(gè)樣本類(lèi)型進(jìn)行陽(yáng)性判斷值確定后，對其他樣本類(lèi)型進(jìn)行驗證。如有差異，應分別進(jìn)行陽(yáng)性判斷值的確定。

5. 其他資料

5.1主要原材料研究資料

此類(lèi)產(chǎn)品的主要原材料一般包括抗原、抗體、對照品/質(zhì)控品/校準品和企業(yè)參考品等。如主要原材料為企業(yè)自制，應提供其詳細的制備、鑒定和質(zhì)量控制過(guò)程，其制備工藝必須相對穩定；如主要原材料源于外購，應提供資料包括：選擇該原材料的依據及對比篩選試驗資料、選定的供應商名稱(chēng)，供應商提供的原材料檢驗報告（質(zhì)量證書(shū)），以及該原材料到貨后的入廠(chǎng)檢驗報告，供應商應為原材料的生產(chǎn)商，不得隨意更換。申請人應對各主要原材料均明確質(zhì)量控制標準。

5.1.1人類(lèi)免疫缺陷病毒抗原

應注重抗原表位的選擇，詳述選擇該抗原的依據及過(guò)程。詳細描述抗原的名稱(chēng)，生物學(xué)來(lái)源、供應商、天然/重組表達信息，提交抗原制備、純化、鑒定及質(zhì)量標準（外觀(guān)、蛋白濃度、純度、分子量、功能性試驗等）等詳細試驗資料。

5.1.2 人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體

抗體的選擇依據及過(guò)程，提交抗體名稱(chēng)、生物學(xué)來(lái)源、免疫原、克隆號及質(zhì)量標準（外觀(guān)、蛋白濃度、純度、分子量、效價(jià)、功能性試驗等）等詳細試驗資料。

5.1.3質(zhì)控線(xiàn)/質(zhì)控品/校準品    

免疫層析方法學(xué)的產(chǎn)品應設置質(zhì)控線(xiàn)，詳述質(zhì)控線(xiàn)相關(guān)原材料（例如羊抗鼠IgG多克隆抗體）的選擇依據和質(zhì)量標準。

質(zhì)控品應至少包含陰性和陽(yáng)性?xún)蓚€(gè)水平。陽(yáng)性質(zhì)控品/校準品可選擇經(jīng)合理稀釋的臨床陽(yáng)性樣本/重組抗原/人源化抗體等；陰性質(zhì)控品/校準品建議選擇臨床陰性樣本或陰性基質(zhì)。提交相關(guān)原料的來(lái)源、選擇和陰、陽(yáng)性確認、溯源等相關(guān)研究資料。企業(yè)應對質(zhì)控品的檢測結果做出明確的范圍要求（試驗有效性的判斷）。

5.1.4其他主要原材料

除上述主要原材料外，產(chǎn)品中包含的其他主要原輔料，如膠體金、標記物（如辣根過(guò)氧化物酶等）、發(fā)光底物（如吖啶酯等）、硝酸纖維素膜、微孔板、磁微粒等，均應進(jìn)行驗證，并提交相關(guān)資料。明確主要原輔料的供應商和質(zhì)量控制標準。免疫層析方法學(xué)的產(chǎn)品如適用于全血，應介紹血細胞去除方式及相關(guān)原材料，并驗證去除效果。

5.1.5企業(yè)參考品

企業(yè)參考品是保證產(chǎn)品性能穩定的重要構成之一。應提交企業(yè)參考品的原料來(lái)源、選擇、制備、陰陽(yáng)性及濃度/滴度確認方法或試劑等相關(guān)驗證資料。企業(yè)參考品的基質(zhì)應與待測樣本相同，對于口腔黏膜滲出液和尿液，如難以獲得大量待測樣本基質(zhì)或樣本穩定性差，可選擇模擬基質(zhì)。企業(yè)參考品的設置應至少包括：陽(yáng)性參考品、陰性參考品、檢測限參考品和重復性參考品。

對于同時(shí)檢測抗原和抗體的試劑，企業(yè)參考品需對抗原和抗體分別設置。

抗體企業(yè)參考品應選擇不同來(lái)源的臨床樣本，其中 O組、2型如難以獲得臨床樣本可選擇商業(yè)參考盤(pán)或免疫制備抗體。其中陽(yáng)性參考品重在評估產(chǎn)品的包容性，并設置不同滴度水平，應覆蓋申報產(chǎn)品聲稱(chēng)可檢出的主要亞型，至少包括M組（B/B'型、BC重組型（包括CRF 07_BC重組型和CRF 08_BC重組型）、AE重組型（CRF 01_AE重組型））、O組（如聲稱(chēng)）、2型（如聲稱(chēng)）。陰性參考品應可評價(jià)產(chǎn)品的特異性，建議包括含有常見(jiàn)內源性干擾物質(zhì)（如適用）溶血、脂血、黃疸、類(lèi)風(fēng)濕因子、唾液、漱口水、尿潛血、總蛋白、尿膽紅素、其他病原體抗體（如梅毒螺旋體、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、結核桿菌）等可能的干擾和交叉樣本。檢測限參考品應包含最低檢測限水平，驗證型別與陽(yáng)性參考品相同。重復性參考品可設置1型、2型（如聲稱(chēng)）各至少兩個(gè)水平的陽(yáng)性樣本，包括最低檢測限附近濃度。

抗原企業(yè)參考品可選擇不同來(lái)源的臨床樣本、病毒培養物、商業(yè)參考盤(pán)或重組抗原等。其中陽(yáng)性參考品重在評估產(chǎn)品的包容性，并設置不同滴度水平，驗證型別應與抗體陽(yáng)性參考品相同。陰性參考品應可評價(jià)產(chǎn)品的特異性，建議包括含有常見(jiàn)內源性干擾物質(zhì)（如適用）溶血、脂血、黃疸、類(lèi)風(fēng)濕因子、唾液、漱口水、尿潛血、總蛋白、尿膽紅素、其他病原體（如乙型肝炎病毒、巨細胞病毒）等可能的干擾和交叉樣本。檢測限參考品應包含最低檢測限水平，驗證型別應與陽(yáng)性參考品相同。重復性參考品可設置1型、2型（如聲稱(chēng)）各至少兩個(gè)水平樣本，包括最低檢測限附近濃度。

5.2生產(chǎn)工藝研究資料

5.2.1產(chǎn)品基本反應原理介紹。

5.2.2主要生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡(jiǎn)要說(shuō)明主要生產(chǎn)工藝的確定依據。

5.2.3包被/標記工藝研究，申請人應考慮如包被/標記液量、濃度、時(shí)間、條件等指標對產(chǎn)品性能的影響，通過(guò)實(shí)驗確定上述指標的最佳組合。

5.2.4顯色系統、酶作用底物等的介紹以及最適條件研究。

5.2.5詳細描述為消除干擾影響、降低假陽(yáng)性率等采取的特殊工藝處理（如表面活性劑的選擇），提交相應研究資料。

（四）產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的格式應符合《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導原則》（原國家食品藥品監督管理總局通告2014年第17號）的要求，進(jìn)口體外診斷試劑的中文說(shuō)明書(shū)除格式要求外，其內容應盡量保持與原文說(shuō)明書(shū)的一致性，翻譯力求準確且符合中文表達習慣。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中相關(guān)技術(shù)內容均應與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結果保持一致，如某些內容引用自參考文獻，則應以規范格式對此內容進(jìn)行標注，并單獨列明文獻的相關(guān)信息。

結合《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導原則》的要求，人類(lèi)免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)應重點(diǎn)關(guān)注以下內容。

1．【預期用途】

1.1該產(chǎn)品用于體外定性檢測人血清/血漿/全血……樣本中的人類(lèi)免疫缺陷病毒（如P24）抗原和（HIV-1/2 M/O組）抗體。

1.2結合臨床和其他實(shí)驗室指標，用于人類(lèi)免疫缺陷病毒感染的輔助診斷。

1.3臨床背景描述：簡(jiǎn)單介紹病原體的生物學(xué)特征、流行病學(xué)、潛伏期、易感人群、感染后的臨床表現及相關(guān)疾病等。簡(jiǎn)要介紹現有的HIV臨床或實(shí)驗室診斷方法。

2.【樣本要求】重點(diǎn)明確以下內容：

2.1樣本采集：明確采集時(shí)間、采集順序、采集量等，是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。說(shuō)明采集方法及樣本類(lèi)型，對于血漿、全血樣本，應注明對抗凝劑的要求。

2.2樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件（如冷藏、冷凍等）及不同保存條件下的保存時(shí)限和運輸條件等。冷藏、冷凍樣本檢測前是否需要恢復室溫，冷凍樣本的凍融次數限制等。如需專(zhuān)用采樣工具應進(jìn)行詳細說(shuō)明。

3.【檢驗方法】

詳細說(shuō)明試驗操作的各個(gè)步驟：

3.1實(shí)驗環(huán)境：實(shí)驗室的溫度、濕度要求，檢測試劑及樣本的復溫要求等。

3.2試劑配制方法，試劑開(kāi)封后使用方法等。

3.3高濃度樣本稀釋的方法。

3.4試驗條件：操作步驟、溫度、時(shí)間、儀器波長(cháng)等。

3.5質(zhì)量控制：操作步驟，質(zhì)控結果的要求（試驗有效性的判斷），質(zhì)控結果不符合要求的處理方式。

3.6對于膠體金法檢測試劑可以圖示形式顯示正確的檢驗操作方法、程序等。特別注意應強調操作溫度及濕度條件、讀取結果的時(shí)間。

3.7特別說(shuō)明檢驗操作過(guò)程中的注意事項。

4.【陽(yáng)性判斷值】說(shuō)明陽(yáng)性判斷值，并簡(jiǎn)要說(shuō)明陽(yáng)性判斷值確定的試驗方法。如陽(yáng)性判斷值需進(jìn)行計算確定，詳細描述具體計算方法。

5.【檢驗結果的解釋】

結合質(zhì)控線(xiàn)/對照品/質(zhì)控品/校準品以及樣本的檢測結果，對所有可能出現的結果組合及相應的解釋進(jìn)行詳述。對于膠體金法檢測試劑可采用圖示形式顯示檢測結果。

對于檢測試劑應明確試驗無(wú)反應，報告為“HIV抗體陰性”。試驗有反應，必須進(jìn)行復檢（使用原有試劑雙孔/雙份檢測或使用原有試劑加另一種試劑檢測）：兩次均無(wú)反應，報告為“HIV抗體陰性”；兩次均有反應，或一個(gè)有反應一個(gè)無(wú)反應，需進(jìn)一步進(jìn)行“補充試驗”。

檢驗結果的解釋?xiě)躁?yáng)性判斷值的研究結論為依據。如有適用的臨床診療指南，則應在此項下引用，相應檢驗結果的解釋?xiě)舷嚓P(guān)指南的要求。如有灰區判定，詳細說(shuō)明灰區樣本的處理方法。

6.【檢驗方法局限性】

綜合產(chǎn)品的預期用途、臨床背景、檢測方法及適用范圍等信息，對可能出現的局限性進(jìn)行相關(guān)說(shuō)明，建議包括以下內容：

6.1  本試劑盒的檢測結果不得作為臨床診治的唯一依據，對患者的臨床管理應結合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗室檢查及治療反應等情況綜合考慮。

6.2不合理的樣本采集、轉運、處理及不當的實(shí)驗操作和實(shí)驗環(huán)境均有可能導致假陰性或假陽(yáng)性結果。

6.3感染初期或艾滋病晚期，抗體可能未產(chǎn)生或者產(chǎn)生水平低于產(chǎn)品最低檢測限，而產(chǎn)生陰性結果。檢測陰性不能排除急性感染，對于可疑的樣本建議進(jìn)行病原學(xué)檢測，或至少間隔7天再次檢測。

6.4評價(jià)血清學(xué)檢測結果時(shí)需要結合患者的臨床病程、基礎狀況以及年齡等因素綜合考慮，如：免疫功能低下、缺陷的人群、產(chǎn)生抗體能力較低的嬰幼兒，可能不產(chǎn)生或產(chǎn)生低滴度的抗體，其血清學(xué)抗體檢測的參考價(jià)值有限。

6.5如疑似窗口期感染，建議依據全國艾滋病檢測技術(shù)規范進(jìn)行后續驗證。。

6.6 HIV-1 p24抗原試驗有反應的樣本，必須經(jīng)過(guò)確證以后才能判斷陽(yáng)性或陰性。

6.7 HIV-1 p24抗原陽(yáng)性?xún)H作為HIV感染的輔助診斷依據；HIV-1 p24抗原陰性結果不能排除HIV感染。

7.【產(chǎn)品性能指標】

根據產(chǎn)品性能評估資料，詳述以下性能指標：企業(yè)參考品符合率、最低檢測限、包容性、精密度、分析特異性（交叉反應和干擾試驗）、鉤狀（HOOK）效應。介紹所用樣本背景信息、數量、濃度，評價(jià)方法及檢測結果。

8.【注意事項】

應至少包括以下內容：

8.1有關(guān)試劑盒內人源組分（如有）生物安全性的警告。如：試劑盒內對照品（質(zhì)控品）或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過(guò)了乙型肝炎病毒表面抗原（HBs-Ag）、丙型肝炎病毒抗體（HCV-Ab）等項目的檢測，結果為陰性，但截至目前，沒(méi)有任何一項檢測可以確保絕對安全，故仍應將這些組分作為潛在傳染源對待。

8.2全血、血漿的運送應符合生物安全要求，參照《可感染人類(lèi)的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規定》。

三、參考文獻

[1]體外診斷試劑注冊與備案管理辦法（國家市場(chǎng)監督管理總局令第48號）[Z].

[2]關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告（國家藥品監督管理局公告2021年第122號）[Z].

[3]體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導原則（原國家食品藥品監督管理總局公告2014年第17號）[Z].

[4]WS -293-2019,艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標準 [S].

[5]中華醫學(xué)會(huì )感染病學(xué)分會(huì )艾滋病丙型肝炎學(xué)組中國疾病預防控制中心,中國艾滋病診療指南[J],中國艾滋病性病,2021.

[6]中國疾病預防控制中心.全國艾滋病檢測技術(shù)規范 [Z].2020.

標簽：艾滋病檢測試劑