肺炎支原體IgM/IgG抗體檢測試劑注冊技術(shù)審查指導原則（2021年第4號）

本指導原則旨在指導注冊申請人對肺炎支原體IgM/IgG抗體檢測試劑注冊申報資料的準備及撰寫(xiě)，同時(shí)也為技術(shù)審評部門(mén)對注冊申報資料的技術(shù)審評提供參考。

本指導原則是對肺炎支原體IgM/IgG抗體檢測試劑的一般要求，申請人應依據產(chǎn)品的具體特性確定其中內容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應的科學(xué)依據，并依據產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內容進(jìn)行充實(shí)和細化。

本指導原則是對申請人和審查人員的指導性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項，亦不作為法規強制執行，如果有能夠滿(mǎn)足相關(guān)法規要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細的研究資料和驗證資料，相關(guān)人員應在遵循相關(guān)法規的前提下使用本指導原則。

本指導原則是在現行法規和標準體系以及當前認知水平下制定的，隨著(zhù)法規和標準的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導原則相關(guān)內容也將適時(shí)進(jìn)行調整。

一、適用范圍

肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae，MP）屬于柔膜體綱，支原體屬，是引起兒童和成人呼吸道感染及社區獲得性肺炎（community-acquired pneumonia，CAP）的常見(jiàn)病原體之一。MP感染廣泛存在于世界各地，平時(shí)散在性發(fā)病，每隔數年會(huì )出現地區周期性流行，每次流行持續數月到數年不等。對于群聚性發(fā)病或初始經(jīng)驗性治療無(wú)效的CAP患者，住院或重癥CAP患者，建議進(jìn)行致病原檢查，明確CAP致病原可有助于進(jìn)行針對性抗感染治療。

肺炎支原體的檢測對于支原體肺炎的診斷至關(guān)重要，實(shí)驗室檢測方法包括病原體培養、抗原檢測、抗體檢測和核酸檢測。肺炎支原體培養難度較大，需采用專(zhuān)門(mén)的培養基和培養技術(shù)，耗時(shí)長(cháng)，但特異性高。血清特異性抗體檢測是目前輔助診斷肺炎支原體肺炎的重要手段，免疫層析法、酶聯(lián)免疫法和化學(xué)發(fā)光法抗體檢測試劑在臨床中廣泛應用。顆粒凝集（particle agglutination，PA）試驗和補體結合（complement fixation，CF）試驗是檢測肺炎支原體抗體的傳統方法，但是無(wú)法區分IgM和IgG。

本指導原則適用于采用免疫層析法、酶聯(lián)免疫法或化學(xué)發(fā)光法，體外定性檢測人血清、血漿或全血中的肺炎支原體IgM和/或IgG抗體的試劑。結合臨床和其他實(shí)驗室指標，可用于肺炎支原體感染的輔助診斷。對基于其他方法學(xué)的試劑，及肺炎支原體其他抗體或總抗體檢測試劑，可能部分要求不完全適用或本文所述內容不夠全面，申請人可以參照本指導原則，根據產(chǎn)品特性對適用部分進(jìn)行評價(jià)或補充其他的評價(jià)資料進(jìn)行相應驗證。

二、注冊申報資料要求

（一）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品預期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性的說(shuō)明、主要研究結果的總結評價(jià)以及同類(lèi)產(chǎn)品上市情況介紹等內容。產(chǎn)品描述中應說(shuō)明產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理，選擇捕獲法或間接法的考慮。同類(lèi)產(chǎn)品上市情況介紹部分應著(zhù)重從方法學(xué)、檢測原理、特異性抗原等主要組成成分、樣本類(lèi)型等方面寫(xiě)明擬申報產(chǎn)品與目前市場(chǎng)上已獲批準的同類(lèi)產(chǎn)品之間的主要區別。

（二）主要原材料的研究資料

此類(lèi)產(chǎn)品的主要原材料一般包括抗原、抗體、對照品/質(zhì)控品/校準品和企業(yè)參考品等。如主要原材料為企業(yè)自制，應提供其詳細的制備、鑒定和質(zhì)量控制過(guò)程，其制備工藝必須相對穩定；如主要原材料源于外購，應提供資料包括：選擇該原材料的依據及對比篩選試驗資料、選定的供應商名稱(chēng)，供應商提供的原材料檢驗報告（質(zhì)量證書(shū)），以及該原材料到貨后的入廠(chǎng)檢驗報告，供應商為原材料的生產(chǎn)商，不得隨意更換。申請人應對各主要原材料均明確質(zhì)量控制標準。

1.肺炎支原體抗原

肺炎支原體抗原決定了檢測的敏感度和特異性，對抗體檢測試劑至關(guān)重要。應注重抗原的選擇，詳細描述抗原的名稱(chēng)，天然/重組表達信息及選擇該抗原的依據。提交抗原來(lái)源、制備、純化、鑒定及質(zhì)量標準（外觀(guān)、蛋白濃度、純度、分子量、功能性試驗等）等詳細試驗資料。

2.抗人IgM/IgG單克隆抗體

詳述抗體的選擇過(guò)程，提交抗體生物學(xué)來(lái)源、免疫原及質(zhì)量標準（外觀(guān)、蛋白濃度、純度、分子量、效價(jià)、功能性試驗等）等詳細試驗資料。

3.質(zhì)控線(xiàn)/對照品/質(zhì)控品/校準品

免疫層析方法學(xué)的產(chǎn)品應設置質(zhì)控線(xiàn)，詳述質(zhì)控線(xiàn)相關(guān)原材料（例如羊抗鼠IgG多克隆抗體）的選擇依據和質(zhì)量標準。

對照品/質(zhì)控品應至少包含陰性和陽(yáng)性?xún)蓚€(gè)水平。陽(yáng)性對照品/質(zhì)控品/校準品可選擇經(jīng)合理稀釋的臨床陽(yáng)性樣本或人源化抗體，陰性對照品/質(zhì)控品/校準品可選擇臨床陰性樣本或陰性基質(zhì)等。提交相關(guān)原料的來(lái)源、選擇和陰、陽(yáng)性確認等相關(guān)研究資料。企業(yè)應對對照品/質(zhì)控品的檢測結果做出明確的范圍要求（試驗有效性的判斷）。

4.其他主要原輔料

除上述主要原材料外，產(chǎn)品中包含的其他主要原輔料，如膠體金、辣根過(guò)氧化物酶、吖啶酯、硝酸纖維素膜、微孔板、磁微粒、樣本稀釋液等，均應進(jìn)行驗證，并提交相關(guān)資料。明確主要原輔料的供應商和質(zhì)量控制標準。免疫層析方法學(xué)的產(chǎn)品如適用于全血，應介紹血細胞去除方式及相關(guān)原材料，并驗證去除效果。

5.企業(yè)參考品

企業(yè)參考品是保證產(chǎn)品性能穩定的重要構成之一。應提交企業(yè)參考品的原料來(lái)源、選擇、制備、陰陽(yáng)性及濃度/滴度確認方法或試劑等相關(guān)驗證資料。企業(yè)參考品的基質(zhì)應與待測樣本相同。企業(yè)參考品的設置應至少包括：陽(yáng)性參考品、陰性參考品、檢測限參考品和重復性參考品。其中陽(yáng)性參考品重在評估產(chǎn)品的包容性，應選擇不同來(lái)源的臨床樣本，并設置不同滴度水平。陰性參考品應可評價(jià)產(chǎn)品的特異性，建議包括含有類(lèi)風(fēng)濕因子、其他病原體抗體等可能的干擾和交叉樣本，對于檢測肺炎支原體IgM抗體的試劑，陰性參考品中建議包括肺炎支原體IgG抗體陽(yáng)性樣本。檢測限參考品可設置臨床陽(yáng)性樣本的系列稀釋樣本，其中應包含最低檢測限水平。重復性參考品可設置至少兩個(gè)水平的臨床陽(yáng)性樣本,包括最低檢測限附近濃度。對于同時(shí)檢測肺炎支原體IgM和IgG抗體的試劑，企業(yè)參考品需對IgM抗體和IgG抗體分別設置。

（三）主要生產(chǎn)工藝及反應體系的研究資料

1.產(chǎn)品基本反應原理介紹。

2.主要生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡(jiǎn)要說(shuō)明主要生產(chǎn)工藝的確定依據。

3.包被/標記工藝研究，申請人應考慮如包被/標記液量、濃度、時(shí)間、條件等指標對產(chǎn)品性能的影響，通過(guò)實(shí)驗確定上述指標的最佳組合。

4.顯色系統、酶作用底物等的介紹以及最適條件研究。

5.反應條件確定：申請人應考慮反應時(shí)間、判讀時(shí)間、反應溫度、洗滌液體積和洗滌次數（如涉及）等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過(guò)實(shí)驗確定上述條件的最佳組合。

6.反應體系中樣品加樣方式及加樣量確定：通過(guò)實(shí)驗確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測，申請人還應對樣本稀釋液及其用量、其他必要的處理方法等進(jìn)行研究。對于IgM抗體檢測試劑，如采用間接法，建議考慮高濃度特異性IgG對結果的影響，合理設置IgG去除相關(guān)樣本處理步驟（例如采用含有IgG吸附劑的樣本稀釋液等），或者詳述產(chǎn)品設計中關(guān)于避免IgG影響IgM檢測結果的合理措施，盡量減少特異性IgG對IgM檢測造成的假陰性和假陽(yáng)性。

（四）分析性能評估資料

申請人應提交在符合質(zhì)量管理體系的生產(chǎn)環(huán)境下生產(chǎn)的試劑進(jìn)行的所有性能評估資料，包括具體研究方法、實(shí)驗方案、實(shí)驗數據、統計分析等詳細資料。有關(guān)分析性能評估的背景信息也應在申報資料中進(jìn)行描述，包括實(shí)驗地點(diǎn)，采用的試劑名稱(chēng)、規格和批號，儀器名稱(chēng)和型號，樣本類(lèi)型和來(lái)源等。分析性能評估的實(shí)驗方法可以參考國際或國內有關(guān)體外診斷試劑性能評估的指導原則進(jìn)行，建議著(zhù)重對以下分析性能進(jìn)行研究。肺炎支原體IgM和IgG抗體的性能應分別研究。

1.企業(yè)參考品檢驗

根據主要原材料研究資料中的企業(yè)參考品設置情況，采用三批產(chǎn)品對企業(yè)參考品進(jìn)行檢驗并提供詳細的實(shí)驗數據。

2.最低檢測限

建議采用已明確肺炎支原體抗體滴度的臨床陽(yáng)性樣本，采用陰性樣本進(jìn)行系列稀釋?zhuān)M(jìn)行最低檢測限的建立和驗證。應采用合理方法確認抗體類(lèi)型和滴度，提供詳細的確認方法及結果。

2.1選取至少3份臨床樣本，系列稀釋獲得多個(gè)濃度梯度，每個(gè)濃度重復檢測不少于3次，以100%可檢出的最低濃度水平作為預設檢測限。在此濃度附近制備若干濃度梯度樣品，每個(gè)濃度至少重復檢測20次，將具有95%陽(yáng)性檢出率的最低濃度作為最低檢測限。

2.2選擇與2.1不同的3份臨床樣本，采用陰性基質(zhì)稀釋到最低檢測限濃度水平進(jìn)行驗證，應達到95%陽(yáng)性檢出率。

3.包容性

應選擇中國境內來(lái)源于不同時(shí)間、不同地域的多份臨床確診且經(jīng)合理方法確定肺炎支原體抗體陽(yáng)性的患者樣本進(jìn)行檢測，建議覆蓋Ⅰ型和Ⅱ型兩個(gè)基因型，檢測結果應與預期結果相符。驗證用樣本的抗體水平應接近檢測限濃度，可采用臨床陰性樣本進(jìn)行稀釋。

4.精密度

申請人應對精密度指標的評價(jià)標準做出合理要求，如變異系數的范圍或顯色強度等。應對可能影響檢測精密度的主要變量進(jìn)行驗證，包括不同時(shí)間、地點(diǎn)、操作者、檢測輪次、試劑批次、適用儀器（如適用）等。

設定合理的精密度評價(jià)周期，例如：為期至少20天的檢測。至少采用3個(gè)水平的臨床樣本進(jìn)行精密度評價(jià)，具體要求如下：

4.1 陰性樣本：待測物濃度低于最低檢測限或為零濃度，陰性檢出率應為100%（n≥20）。

4.2臨界陽(yáng)性樣本：待測物濃度略高于試劑的最低檢測限，陽(yáng)性檢出率應大于95%（n≥20）。

4.3中/強陽(yáng)性樣本：待測物濃度呈中度到強陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率為100%，變異系數（CV）應在合理的可接受范圍內（如適用）（n≥20）。

5.分析特異性

5.1交叉反應

應對肺炎支原體的近緣微生物抗體，易引起相同或相似的臨床癥狀，及易合并感染的微生物抗體（表1）進(jìn)行交叉反應驗證。同時(shí)進(jìn)行高濃度肺炎支原體特異性IgG抗體和IgM抗體之間的交叉反應驗證。

如果試劑原料采用基因重組抗原，則還需考慮對重組基因導入微生物特異性抗體的交叉反應評價(jià)。例如采用大腸埃希菌作為宿主菌進(jìn)行重組抗原的表達，建議考慮大腸埃希菌抗體陽(yáng)性樣本可能產(chǎn)生的交叉反應。

交叉反應用臨床樣本中相關(guān)病原體抗體滴度水平應較高，并且抗體類(lèi)型（IgM、IgG）應與申報試劑檢測抗體類(lèi)型一致。提供所有用于交叉反應驗證的樣本來(lái)源、陰陽(yáng)性和滴度確認等信息。

表1 用于交叉反應研究的病原體抗體陽(yáng)性血液樣本

注：＊項為選擇性驗證

5.2干擾試驗

應根據所采集樣本類(lèi)型，選擇適用的干擾物質(zhì)進(jìn)行研究。建議申請人在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度（“最差條件”）下，采用待測抗體為弱陽(yáng)性和陰性水平的多例樣本進(jìn)行試驗，應至少包括下列可能的干擾物質(zhì)。

5.2.1 內源性干擾物質(zhì)：血紅蛋白、膽紅素、血脂、類(lèi)風(fēng)濕因子、其他自身免疫性抗體，異嗜性抗體（如HAMA）、總IgG、總IgM、紅細胞壓積（全血樣本適用），高濃度肺炎支原體特異性IgG抗體與特異性IgM抗體的干擾。

5.2.2常見(jiàn)治療性藥物：左氧氟沙星、莫西沙星、吉米沙星等喹諾酮類(lèi)抗菌藥物，阿奇霉素、克拉霉素、紅霉素等大環(huán)內酯類(lèi)抗菌藥物，多西環(huán)素、米諾環(huán)素等四環(huán)素類(lèi)抗菌藥物。

5.2.3 癥狀相關(guān)其他經(jīng)驗性藥物。

5.2.4抗凝劑：如果試劑盒適用樣本類(lèi)型包括血漿、全血樣本，可采用一定數量同源樣本通過(guò)比對試驗的方法，驗證各種抗凝劑的適用性。

6. IgM抗體破壞試驗

對于肺炎支原體IgM抗體檢測試劑，建議對至少5份含有肺炎支原體特異性IgM抗體的樣本進(jìn)行IgM破壞實(shí)驗研究，方法為采用特定的化學(xué)制劑（如2－巰基乙醇或二硫蘇糖醇）處理樣本后，重新進(jìn)行檢測，IgM檢測結果應為陰性。

7.鉤狀（HOOK）效應研究

須采用多份高滴度樣本進(jìn)行梯度稀釋后由低濃度至高濃度分別檢測，每個(gè)梯度的稀釋液重復3～5次，對鉤狀效應進(jìn)行合理的驗證。

8.其他需注意問(wèn)題

對于使用儀器進(jìn)行結果判讀的產(chǎn)品，應提供產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)【適用機型】項中所有型號儀器的性能評估資料。

9.適用的樣本類(lèi)型

如產(chǎn)品適用于血清和血漿，可采用同源比對驗證樣本的可比性。如產(chǎn)品適用于靜脈全血，建議進(jìn)行最低檢測限和精密度研究，同時(shí)進(jìn)行同源比對試驗。

（五）陽(yáng)性判斷值確定資料

提交對申報試劑陰性/陽(yáng)性結果判斷的陽(yáng)性判斷值（cut-off）確定資料，包括具體的試驗方案、人群及樣本選擇、評價(jià)標準、統計學(xué)分析和研究數據等。建立陽(yáng)性判斷值的樣本選擇應考慮不同的地理區域、不同的感染階段和生理狀態(tài)等因素的影響，納入陰性、陽(yáng)性及臨界值附近的樣本。肺炎支原體IgM抗體陽(yáng)性樣本，可采用急性期且顆粒凝集試驗滴度1：160的樣本，或采用其他合理方法確定。如檢測結果為數值形式，建議采用受試者工作特征曲線(xiàn)（receiver operating characteristic curve，ROC）的分析方式來(lái)確定合理的陽(yáng)性判斷值；如試驗結果存在灰區（equivocal zone），應明確灰區建立的基礎。

如產(chǎn)品適用多個(gè)樣本類(lèi)型，應明確不同的樣本類(lèi)型是否存在差異，如無(wú)差異，可采用一個(gè)樣本類(lèi)型進(jìn)行陽(yáng)性判斷值確定后，對其他樣本類(lèi)型進(jìn)行驗證。如有差異，應分別進(jìn)行陽(yáng)性判斷值的確定。

（六）穩定性研究資料

穩定性研究資料主要涉及兩部分內容，申報試劑的穩定性和適用樣本的穩定性研究。

1.申報試劑的穩定性主要包括實(shí)時(shí)穩定性（有效期）、開(kāi)瓶（開(kāi)封）穩定性、凍融穩定性（如涉及）、機載穩定性（如涉及）、運輸穩定性等研究。如果產(chǎn)品配套校準品，還應對校準頻率進(jìn)行研究。申請人可根據實(shí)際需要選擇合理的穩定性研究方案。穩定性研究資料應包括研究方法的確定依據、具體的實(shí)施方案、詳細的研究數據以及結論。對于實(shí)時(shí)穩定性研究，應提供至少三批樣品在實(shí)際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

2.適用樣本的穩定性

樣本穩定性一般包括樣本各種實(shí)際運輸及儲存（常溫、冷藏和冷凍）條件下的保存期限驗證，以確認樣本的保存條件及保存時(shí)間?？梢栽诤侠淼臏囟确秶鷥?，每間隔一定的時(shí)間段即對儲存樣本進(jìn)行驗證，從而確認不同類(lèi)型樣本的穩定性?？衫鋬霰４娴臉颖具€應對凍融次數進(jìn)行合理驗證。

（七）臨床評價(jià)資料

開(kāi)展臨床試驗應滿(mǎn)足《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則》（原國家食品藥品監督管理總局通告2014年第16號）的要求，如相關(guān)法規、文件有更新，臨床試驗應符合更新后的要求。下面僅說(shuō)明該類(lèi)產(chǎn)品臨床試驗中應關(guān)注的重點(diǎn)問(wèn)題。

1.臨床試驗機構及人員

申請人應根據產(chǎn)品特點(diǎn)及預期用途，選擇不少于3家（含3家）已備案且具備該產(chǎn)品臨床試驗能力的臨床機構開(kāi)展臨床試驗。

2.臨床試驗適用人群

申請人應選擇體征/癥狀符合呼吸道感染的目標人群，臨床試驗的受試人群應盡可能全面地代表預期人群。臨床上，學(xué)齡前、學(xué)齡兒童及青少年為肺炎支原體的易感人群，在進(jìn)行臨床試驗時(shí)應注意入組受試者代表性。建議受試者中易感人群比例不低于50%，且受試者年齡分布應均衡。

3.臨床試驗方法

臨床試驗采用試驗用體外診斷試劑與已上市同類(lèi)產(chǎn)品（對比試劑）進(jìn)行比較研究的方法，評價(jià)兩種方法檢測結果的一致性，評價(jià)指標通常包括陽(yáng)性符合率、陰性符合率等。對比試劑在預期用途、適用人群、樣本類(lèi)型、檢測方法學(xué)、檢測性能等方面應與試驗用體外診斷試劑具有較好的可比性?？紤]到試驗用體外診斷試劑的預期用途，臨床試驗中陽(yáng)性和陰性樣本均應包括一定量的新鮮樣本。

體外診斷試劑的比較研究試驗中應對受試者樣本設盲，并使檢測順序隨機，以避免因操作者和檢測結果的評價(jià)者知曉受試者的疾病診斷或對比試劑檢測結果等信息而引入偏倚。對于結果不一致的樣本建議通過(guò)合理的方式進(jìn)行分析，分析方式包括不一致樣本的第三方試劑復測、與金標準的一致性研究等。

對于肺炎支原體特異性IgM檢測試劑，申請人還應對急性期患者樣本進(jìn)行試驗用體外診斷試劑與急性期確認參考方法的一致性研究，以評價(jià)試驗用體外診斷試劑的臨床靈敏度。選擇不少于30例處于感染急性期患者的樣本。急性期確認參考方法一般包括：肺炎支原體特異性IgG抗體的血清學(xué)轉換（動(dòng)態(tài)監測2份或以上的血清IgG，恢復期與急性期比較IgG呈4倍以上升高），呼吸道樣本（咽拭子、痰液等）核酸檢測或分離培養等。

4.樣本類(lèi)型

肺炎支原體抗體檢測試劑的樣本類(lèi)型通常涉及血清、血漿及全血。臨床試驗時(shí)應以其中一種樣本類(lèi)型為主進(jìn)行臨床試驗。其他樣本類(lèi)型可通過(guò)同源樣本一致性比對方式進(jìn)行樣本類(lèi)型適用性臨床驗證。如血清與血漿樣本之間經(jīng)臨床前研究階段驗證不存在性能差異，可以在各具有一定數量的前提下，通過(guò)合并統計的方式證明兩種樣本類(lèi)型的適用性。

臨床樣本的采集、處理、保存等應分別滿(mǎn)足臨床試驗中所涉及各產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求。

5.樣本量

建議采用單組目標值法估算臨床試驗的最低樣本量，通過(guò)陽(yáng)性符合率計算所需陽(yáng)性樣本的例數，通過(guò)陰性符合率計算所需陰性樣本的例數，同時(shí)考慮脫落情況，估算最低樣本總量。試驗用體外診斷試劑所能達到的陽(yáng)性符合率和陰性符合率預期值建議經(jīng)過(guò)小規模預試驗獲得。根據現有認知，建議陽(yáng)性符合率目標值設定不低于90%，陰性符合率目標值設定不低于95%。當符合率預期值遠高于目標值時(shí)，應采用其他的方法進(jìn)行樣本量的估算。

6.臨床試驗方案

各臨床試驗機構的方案應一致，且保證在整個(gè)臨床試驗過(guò)程中遵循預定的方案，不可隨意改動(dòng)。

試驗方案應確定嚴格的入選/排除標準，任何已入選的樣本被排除出臨床試驗都應記錄在案并明確說(shuō)明原因。同時(shí)，所制定的臨床試驗方案應符合所涉及各產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的要求。

7.統計學(xué)分析

應對臨床試驗入組情況及數據結果進(jìn)行詳細的描述及統計，建議對不同年齡段人群入組情況進(jìn)行說(shuō)明。

選擇2×2列聯(lián)表的形式展示兩種試劑的定性檢測結果。計算陰性符合率、陽(yáng)性符合率、總符合率及相應的95%置信區間，同時(shí)需進(jìn)行Kappa一致性檢驗。

8.臨床試驗報告

應對試驗的整體設計及各個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)給予清晰、完整的闡述，應該對整個(gè)臨床試驗設計、實(shí)施過(guò)程、結果分析、結論等進(jìn)行條理分明的描述，并應包括必要的數據和統計分析方法、必要的討論。

（八）產(chǎn)品技術(shù)要求

申請人應當在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩定的前提下，根據產(chǎn)品研制、前期評價(jià)等結果，依據國家標準、行業(yè)標準及有關(guān)文獻資料，按照《醫療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫(xiě)指導原則》（原國家食品藥品監督管理總局通告2014年第9號）的有關(guān)要求，編寫(xiě)產(chǎn)品技術(shù)要求。

肺炎支原體IgM/IgG抗體檢測試劑的產(chǎn)品性能指標應主要包括：物理性狀、陽(yáng)性參考品符合率、陰性參考品符合率、重復性、最低檢測限等。

按照《體外診斷試劑注冊管理辦法》（原國家食品藥品監督管理總局令第5號，下文簡(jiǎn)稱(chēng)《辦法》）的規定，此類(lèi)產(chǎn)品為第三類(lèi)體外診斷試劑，申請人應按照《醫療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫(xiě)指導原則》的要求，以附錄形式明確主要原材料、生產(chǎn)工藝及半成品要求，附錄的編制應符合相關(guān)編寫(xiě)規范的要求。

（九）產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的格式應符合《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導原則》（原國家食品藥品監督管理總局通告2014年第17號）的要求，進(jìn)口體外診斷試劑的中文說(shuō)明書(shū)除格式要求外，其內容應盡量保持與原文說(shuō)明書(shū)的一致性，翻譯力求準確且符合中文表達習慣。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中相關(guān)技術(shù)內容均應與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結果保持一致，如某些內容引用自參考文獻，則應以規范格式對此內容進(jìn)行標注，并單獨列明文獻的相關(guān)信息。

結合《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導原則》的要求，肺炎支原體IgM/IgG抗體檢測試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)應重點(diǎn)關(guān)注以下內容。

1．【預期用途】

1.1該產(chǎn)品用于體外定性檢測人血清/血漿/全血樣本中的肺炎支原體IgM/IgG抗體。

1.2結合臨床和其他實(shí)驗室指標，用于肺炎支原體感染的輔助診斷。

1.3臨床背景描述：簡(jiǎn)單介紹病原體的生物學(xué)特征、流行病學(xué)、潛伏期、易感人群、感染后的臨床表現及相關(guān)疾病等。簡(jiǎn)要介紹現有的肺炎支原體臨床或實(shí)驗室診斷方法。

2.【樣本要求】重點(diǎn)明確以下內容：

2.1樣本采集：明確采集時(shí)間、采集順序、采集量等，是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。說(shuō)明采集方法及樣本類(lèi)型，對于血漿、全血樣本，應注明對抗凝劑的要求。

2.2干擾物的影響：明確常見(jiàn)干擾物對實(shí)驗結果是否產(chǎn)生影響，明確可接受的最大干擾物濃度。

2.3樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件（如冷藏、冷凍等）及不同保存條件下的保存時(shí)限和運輸條件等。冷藏、冷凍樣本檢測前是否需要恢復室溫，冷凍樣本的凍融次數限制等。

3.【檢驗方法】

詳細說(shuō)明試驗操作的各個(gè)步驟：

3.1實(shí)驗環(huán)境：實(shí)驗室的溫度、濕度要求，檢測試劑及樣本的復溫要求等。

3.2試劑配制方法，試劑開(kāi)封后使用方法等。

3.3高濃度樣本稀釋的方法。

3.4試驗條件：操作步驟、溫度、時(shí)間、儀器波長(cháng)等。

3.5質(zhì)量控制：操作步驟，質(zhì)控結果的要求（試驗有效性的判斷），質(zhì)控結果不符合要求的處理方式。

3.6對于膠體金法檢測試劑可以圖示形式顯示正確的檢驗操作方法、程序等。特別注意應強調操作溫度及濕度條件、讀取結果的時(shí)間。

3.7特別說(shuō)明檢驗操作過(guò)程中的注意事項。

4.【陽(yáng)性判斷值】說(shuō)明陽(yáng)性判斷值，并簡(jiǎn)要說(shuō)明陽(yáng)性判斷值確定的試驗方法。如陽(yáng)性判斷值（CO值）需進(jìn)行計算確定，詳細描述具體計算方法。

5.【檢驗結果的解釋】

結合質(zhì)控線(xiàn)/對照品/質(zhì)控品/校準品以及樣本的檢測結果，對所有可能出現的結果組合及相應的解釋進(jìn)行詳述。對于膠體金法檢測試劑可采用圖示形式顯示檢測結果。檢驗結果的解釋?xiě)躁?yáng)性判斷值的研究結論為依據。如有適用的臨床診療指南，則應在此項下引用，相應檢驗結果的解釋?xiě)舷嚓P(guān)指南的要求。如有灰區判定，詳細說(shuō)明灰區樣本的處理方法。

6.【檢驗方法局限性】

綜合產(chǎn)品的預期用途、臨床背景、檢測方法及適用范圍等信息，對可能出現的局限性進(jìn)行相關(guān)說(shuō)明，建議包括以下內容：

6.1  本試劑盒的檢測結果不得作為臨床診治的唯一依據，對患者的臨床管理應結合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗室檢查及治療反應等情況綜合考慮。

6.2不合理的樣本采集、轉運、處理及不當的實(shí)驗操作和實(shí)驗環(huán)境均有可能導致假陰性或假陽(yáng)性結果。

6.3感染初期，抗體可能未產(chǎn)生或者產(chǎn)生水平低于產(chǎn)品最低檢測限，而產(chǎn)生陰性結果。檢測陰性不能排除急性感染，對于可疑的樣本建議進(jìn)行病原學(xué)檢測，或至少間隔7天再次檢測。

6.4評價(jià)血清學(xué)檢測結果時(shí)需要結合患者的臨床病程、基礎狀況以及年齡等因素綜合考慮，如：免疫功能低下、缺陷的人群、產(chǎn)生抗體能力較低的嬰幼兒，可能不產(chǎn)生或產(chǎn)生低滴度的抗體，其血清學(xué)抗體檢測的參考價(jià)值有限。

6.5在近幾個(gè)月內接受過(guò)輸血或其他血液制品治療的人群，對其陽(yáng)性檢測結果的分析應慎重。

6.6肺炎支原體IgG抗體在部分治愈患者體內持續存在，短期內再次感染的患者確診應進(jìn)行肺炎支原體的抗體滴度動(dòng)態(tài)檢測或核酸定量檢測以進(jìn)行佐證。

7.【產(chǎn)品性能指標】

詳述以下性能指標：企業(yè)參考品符合率、最低檢測限、包容性、精密度、分析特異性（交叉反應和干擾試驗）、鉤狀（HOOK）效應。介紹所用樣本背景信息、數量、濃度，評價(jià)方法及檢測結果。

8.【注意事項】

應至少包括以下內容：

8.1有關(guān)試劑盒內人源組分（如有）生物安全性的警告。如：試劑盒內對照品（質(zhì)控品）或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過(guò)了乙型肝炎病毒表面抗原（HBs-Ag）、人類(lèi)免疫缺陷病毒1/2型抗體（HIV1/2-Ab）、丙型肝炎病毒抗體（HCV-Ab）等項目的檢測，結果為陰性，但截至目前，沒(méi)有任何一項檢測可以確保絕對安全，故仍應將這些組分作為潛在傳染源對待。

8.2有關(guān)實(shí)驗操作、樣本保存及處理等其他注意事項。

三、參考文獻

1.《體外診斷試劑注冊管理辦法》（原國家食品藥品監督管理總局令第5號），2014年7月30日

2.《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則》（原國家食品藥品監督管理總局公告2014年第16號），2014年9月11日.

3.《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導原則》（原國家食品藥品監督管理總局公告2014年第17號），2014年9月11日

4.《國家食品藥品監督管理總局關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》（原國家食品藥品監管總局公告2014年第44號），2014年9月5日

5.中華醫學(xué)會(huì )兒科學(xué)分會(huì )臨床檢驗學(xué)組，兒童肺炎支原體呼吸道感染實(shí)驗室診斷中國專(zhuān)家共識，中華檢驗醫學(xué)雜志，2019年7月第42卷第7期

6.中華醫學(xué)會(huì )呼吸病學(xué)分會(huì )，中國成人社區獲得性肺炎診斷和治療指南（2016年版），中華結核和呼吸雜志，2016年4月第39卷第4期

7.陸權，陸敏. 肺炎支原體感染的流行病學(xué)[J]. 中華兒科雜志，2016，54（3）:196-197

8.中華醫學(xué)會(huì )呼吸病學(xué)分會(huì )感染學(xué)組，成人肺炎支原體肺炎診治專(zhuān)家共識，中華結核和呼吸雜志，2010年9月第33卷第9期

四、起草單位

國家藥品監督管理局醫療器械技術(shù)審評中心。